把ELISA檢測試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。對于一個旨在分離CD4陽性T的試劑盒來說，操作流程主要有以下幾步。首先，將樣品與anti-CD4抗體包被的磁珠共同孵育，使抗體與CD4+T結(jié)合。然后洗去不需要的非目標（即不表達CD4的），留下磁珠-抗體-復(fù)合物。

將上述復(fù)合物與能結(jié)合anti-CD4抗體的二抗一起孵育胞，形成磁珠-抗體-二抗復(fù)合物。我們可以用磁鐵去除這種磁珠-抗體-二抗復(fù)合物，而所有的CD4+細胞留在上清中。zui后，只需將上清轉(zhuǎn)移就可以進行下游研究了。

ELISA檢測試劑盒試驗有必要恪守以下3個中心原理：

（1）抗原或抗體能吸附于固相載體表面，并堅持其免疫學活性；

（2）抗原或抗體可通過共價鍵與酶銜接構(gòu)成酶結(jié)合物，而此種酶結(jié)合物仍能堅持其免疫學和酶學活性；

（3）酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，可依據(jù)參加底物的色彩反響來斷定是否有免疫反響的存在，并且色彩反響的深淺是與標本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的，ELISA檢測試劑盒可依據(jù)已知濃度的抗原或抗體的色彩反響的深淺制作規(guī)范曲線并依此計算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。

ELISA檢測試劑盒免費代測注意事項

1．從2-8℃取出的試劑盒，在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差

3．建議所有標準品、樣本都做雙份檢測。

4．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

5．為避免交叉污染，要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。

6．不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

7．底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。